建立了一种新的乳源外泌体的二维高效液相色谱纯度分析方法
发布时间：
2024-07-12
来源：
https://doi.org/10.1101/2023.02.22.529450
作者:陆路1，#，韩春乐1，#，张权1，#，王淼1，祁冬丽1，高梦雅1，王娜3，尹建新1，董凤伟1，葛啸虎1,2，*
发布日期:2023-02-23
摘要:外泌体作为细胞间通讯载体参与了许多生物过程。由于外泌体作为细胞和基因治疗以及药物递送应用的天然载体被越来越多地探索，因此拥有高质量的样品至关重要。蛋白:颗粒比法、ELISA法、western blotting法、聚合酶链反应法和排粒径高效液相色谱法是近年来广泛应用于外泌体纯度分析的主要方法。然而，目前还没有一种行之有效的方法可以方便地对外泌体样品中的小尺寸杂质进行常规质量分析。本文采用尺寸排除高效液相色谱法(SE-HPLC)、离子交换高效液相色谱法(IEX-HPLC)和新型二维高效液相色谱法(2D-HPLC)对牛乳源性外泌体的纯度进行了检测，并对不同的外泌体分离工艺进行了详细的研究。结果表明，2D-HPLC法能够提高检测外泌体纯度的准确性，具有较高的仪器精度和准确性，减少了人员误差和实验成本，大大缩短了分析时间，自动化程度更高。2D-HPLC方法快速、选择性高、灵敏度好，适用于外泌体的药物和毒理学分析。
